تنزيل المقال
تنزيل المقال
هل سبق ورغبت في تربية البكتيريا بغرض استخدامها لمشروع علمي أو لمجرد المتعة؟ الأمر بسيطٌ للغاية لدرجة مدهشة، فكل ما تحتاجه هو بعض الأجار الغذائي (مادة هلامية خاصة) وعدد من أطباق بتري المعقمة (وعاء زجاجي مسطح دائري الشكل وشفاف مع غطاء) وبعض مصادر البكتيريا الجيدة لدرجة القرف.
الخطوات
-
جهز الأجار. الأجار هو مادة شبيهة بالجيلي تستخدم لاستزراع البكتيريا وهو مصنوع من نوع من الطحلب الأحمر الذي يوفر سطحًا مثاليًا لنمو العديد من أنواع البكتيريا المختلفة. تحتوي بعض أنواع الأجار على مواد غذائية مضافة (مثل: دم الخراف) والتي تساعد على تحفيز نمو بكتيري أكثر نشاطًا.
- أسهل نوع من الأجار يمكن استخدامه في هذه التجربة هو الأجار الغذائي الذي يأتي في صورة مسحوق. استخدم القدر الذي تحتاجه من الأجار شرط ألا يقل عن 1,2 جم (نصف ملعقة صغيرة تقريبًا) من المسحوق لكل طبق بتري 10 سم تستخدمه.
- قلب نصف ملعقة صغيرة من مسحوق الأجار الغذائي في 60 مل (1/4 كوب تقريبًا) من الماء الساخن في وعاء أو صحن مقاوم للحرارة. ضاعف هذه الكميات لأي عدد تخطط لاستخدامه من أطباق بتري.
- ضع الوعاء أو الطبق في الميكروويف وابدأ بغليه لدقيقة واحدة مع مراقبته للتأكد من عدم غليان محلول الأجار وانسكابه.
- يجب أن يكون مسحوق الأجار مذابًا بالكامل وأن يكون السائل شفافًا حين يجهز المحلول.
- اترك محلول الأجار ليبرد لعدة دقائق قبل المتابعة. [١] X مصدر بحثي
-
جهز أطباق بتري. أطباق بتري هي حاويات صغيرة مسطحة من الأسفل ومصنوعة من الزجاج أو البلاستيك الشفاف وتتكون من نصفين –علوي وسفلي- واللذين يدخل أحدهما في الآخر. يحمي هذا المحتويات من أي هواء ملوث غير مرغوب ولكنه يسمح بخروج أي غازات ناتجة عن البكتيريا.
- يجب تعقيم أطباق بتري بالكامل قبل استخدامها لاستزراع البكتيريا وإلا فقد تتأثر نتائج التجربة. يفترض أن تكون أطباق بتري المشتراة حديثًا مسبقة التعقيم ومغلفة بكيس بلاستيكي مغلق.
- أخرج طبق بتري من عبوته وافصل نصفيه. اسكب محلول الأجار الدافئ بحذر شديد في النصف السفلي من طبق بتري، ما يكفي لتكوين طبقة فوق قعر الطبق فحسب.
- أعد وضع النصف العلوي من الطبق بسرعة لمنع أي بكتيريا محمولة هوائيًا من تلويث التجربة. ضع أطباق بتري جانبًا لمدة 30 دقيقة إلى ساعتين حتى يبرد محلول الأجار ويتماسك (سيشبه الجيلي المتماسك حين يجهز). [٢] X مصدر بحثي
-
برد أطباق بتري لحين تستعد لاستخدامها. لابد من حفظ أطباق بتري المليئة بالأجار في الثلاجة على الفور إذا لم تكن مستعدًا لاستخدامها لحين تجهز لمتابعة التجربة.
- حفظ أطباق بتري في الثلاجة يمنع تبخر الماء الموجود بداخلها (تحتاج البكتيريا بيئة رطبة لتنمو)، كما أنها تمكن سطح الأجار من التصلب قليلًا ما يمنع قطعه أو انخلاعه عندما تنقل عينات البكتيريا.
- يجب وضع الأطباق بشكل مقلوب عند حفظها في الثلاجة. يساعد هذا على منع أي بخار متكثف على الغطاء من السقوط والإخلال بالسطح النامي.
- يمكن حفظ أطباق بتري المليئة بالأجار في الثلاجة لمدة شهرين. أخرجها من الثلاجة وأنت تستعد لاستخدامها واتركها تصل لدرجة حرارة الغرفة قبل إدخال عيناتك.
-
أدخل البكتيريا لأطباق بتري. تصبح جاهزًا للجزء الشيق –ألا وهو إدخال البكتيريا- عند تماسك محلول الأجار ووصول أطباق بتري لدرجة حرارة الغرفة. يوجد طريقتان لفعل ذلك، إما من خلال التلامس المباشر وإما جمع العينات.
- التلامس المباشر : وهو عند نقل البكتيريا إلى طبق بتري بالتلامس المباشر مثل لمس الأجار. تتمثل إحدى أكثر الطرق شيوعًا لفعل ذلك في الضغط بأنملة إصبعك (سواءً قبل غسل يديك أو بعده) برفق على سطح الأجار، لكن يمكنك كذلك تجربة الضغط بظفرك أو بسطح عملة قديمة على الأجار أو حتى وضع شعرة صغيرة أو قطرة حليب في الطبق. استخدم مخيلتك.
- جمع العينات : يمكنك بهذه الطريقة جمع البكتيريا من أي سطح تقريبًا ونقلها لطبق بتري. كل ما تحتاجه هو بعض المسحات القطنية النظيفة. تناول مسحة فحسب ومررها على أي سطح يمكنك التفكير به؛ داخل فمك أو على مقبض الباب أو المفاتيح الموجودة بلوحة مفاتيح الحاسوب أو أزرار جهاز التحكم عن بعد، ثم استخدمها لمسح سطح الأجار (دون قطعه). تعد هذه الأماكن ملجأً للكثير من البكتيريا ويجب أن تنال منها بعض النتائج المثيرة للاهتمام (والمقززة) في غضون يومين.
- يمكنك وضع أكثر من عينة بكتيريا في كل طبق بتري إذا أردت. كل ما عليك فعله هو تقسيم الطبق لأرباع ومسح عينة بكتيريا مختلفة في كل منها.
- نوصي بأن تبقي أحد أرباع طبق بتري خاليًا من البكتيريا لتستخدمه كمجموعة تحكم. يُمكّنك هذا من معرفة ما إذا كان الأجار قد تلوث قبل إدخال عينات البكتيريا.
-
ضع ملصقات على أطباق بتري وأغلقها. عليك أن تعيد وضع الغطاء على طبق بتري وتغلقه بشريط لاصق بعد إدخال البكتيريا.
- احرص على وضع ملصق على كل طبق بتري يوضح مصدر البكتيريا التي يحتويها وإلا فلن تتمكن من تمييزها. يمكنك فعل ذلك باستخدام شريط لاصق وقلم خطاط.
- يمكنك وضع كل طبق من أطباق بتري في كيس بسحاب كإجراء احتياطي إضافي. يوفر ذلك حماية إضافية ضد مستعمرات البكتيريا الخطرة التي قد تتطور، كما يمكنك من رؤية المحتويات.
-
ضع أطباق بتري في مكان مظلم ودافئ. اترك أطباق بتري في مكان دافئ ومظلم دون إزعاج، لأنه يمكن للبكتيريا أن تنمو لعدة أيام. تذكر أن تحفظ الأطباق وهي مقلوبة حتى لا يتأثر النمو البكتيري بأي تقاطر للماء.
- تتراوح درجة الحرارة المثالية لنمو البكتيريا بين 20-37ْ س. يمكنك وضع أطباق بتري في مكان أبرد إذا لزم الأمر لكن البكتيريا ستنمو بصورة أبطأ بكثير.
- اترك البكتيريا لتنمو لمدة 4-6 أيام، وهو ما يمنح المزرعة وقتًا كافيًا للنمو. قد تلاحظ صدور رائحة عن الأطباق عندما تبدأ البكتيريا بالنمو.
-
دوّن نتائجك. ستلاحظ مجموعة هائلة من البكتيريا والعفن والفطريات النامية داخل كل طبق بتري بعد يومين.
- استخدم مفكرة لتدوين ملاحظاتك عن محتويات كل طبق وربما تصل لاستنتاج يتعلق بالمكان الذي يحتوي على أكثر قدر من البكتيريا.
- هل كان ذلك داخل فمك؟ أم على مقبض الباب؟ أم على أزرار جهاز التحكم عن بعد؟ قد تفاجئك النتائج.
- يمكنك قياس النمو اليومي لمستعمرات البكتيريا إذا أردت باستخدام قلم خطاط لرسم دائرة حول كل مستعمرة في قاع طبق بتري. يفترض أن تجد مجموعة من الحلقات المتركزة في قاع كل طبق بعد عدة أيام.
-
اختبر فعالية العوامل المضادة للبكتيريا. يعتبر إدخال عامل مضاد للبكتيريا (معقم اليدين أو الصابون... إلخ) إلى طبق بتري لاختبار فعالية التجربة تعديلًا مثيرًا للاهتمام.
- استخدم مسحة قطنية لوضع قطرة صغيرة من جل تعقيم اليدين أو الصابون المطهر أو المطهر المنزلي في مركز عينة البكتيريا بعد إدخالها في طبق بتري ثم تابع التجربة كالمعتاد.
- يجب أن ترى حلقة أو "هالة" حول البقعة التي وضعت بها العامل المضاد للبكتيريا مع نموها في الطبق إذ أنها لن تنمو بهذه البقعة. يعرف هذا باسم "منطقة القتل" (أو "نطاق التثبيط" لمزيد من الدقة).
- يمكنك قياس فعالية العوامل المختلفة المضادة للبكتيريا عن طريق مقارنة حجم مناطق القتل في أطباق بتري. كلما اتسعت منطقة القتل زادت فعالية العامل المقاوم للبكتيريا.
-
خذ احتياطات السلامة الملائمة. عليك اتخاذ احتياطات السلامة الملائمة قبل محاولتك التخلص من أطباق بتري.
- لن تكون معظم البكتيريا التي تعمل على تكاثرها خطرة، إلا أن مستعمرات البكتيريا الكبيرة قد تشكل خطرًا، لذا سيكون عليك قتلها قبل التخلص منها باستخدام مطهر منزلي.
- احمِ يديك من المطهر بارتداء قفازات مطاطية واحمِّ عينيك بنظارة بلاستيكية وثيابك بارتداء مريلة.
-
اسكب المطهر في أطباق بتري. افتح طبق بتري وصب كمية صغيرة من المطهر بحرص على مستعمرات البكتيريا مع إمساك الطبق فوق المغسلة. سيدمر هذ البكتيريا.
- كن شديد الحرص كيلا يلمس المطهر بشرتك لأنه سيحرقها.
- ضع طبق بتري المعقم في كيس بسحاب وتخلص منه برميه في القمامة.
أفكار مفيدة
- جرب استخدام أجار البطاطس بالدكستروز كوسط نمو. جهز وسط دكستروز البطاطس عن طريق غلي 20 جم بطاطس و4 جم دكستروز في أنبوب زجاجي. ضع هذا المحلول في طبق بتري واتركه يجف. خذ بعض المسحات القطنية المعقمة وافركها بأي مكان (جهاز التحكم أو مقبض الباب أو أنبوب الماء، إلخ). أغلق طبق بتري باستخدام لفافة بلاستيكية. اتركها لتتحضن 24 ساعة في مكان دافئ. تفقد طبق بتري في اليوم التالي. يجب أن تكون قادرًا على رؤية مستعمرات البكتيريا.
تحذيرات
- لا تضع في الطبق أي شيء يحتمل أن ينمو ليصبح بكتيريا خطرة أبدًا (يجب ألا توضع سوائل الجسم أبدًا في طبق بتري) فإذا أعيد فتح الطبق يمكن أن يسبب مرضًا خطيرًا.
== المصادر ==
