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Tal vez quieras desnaturalizar una proteína para un proyecto de ciencias, o tal vez hayas leído sobre alimentos desnaturalizados y quieres saber cómo funcionan. La desnaturalización es el proceso por el cual una proteína pierde su forma y estructura debido a acciones de fuerzas externas que incluyen calor, ácidos y solventes. [1] X Fuente de investigación La forma exacta en que desnaturaliza una proteína depende de la proteína en particular con la que deseas trabajar, ya que todas requieren diferentes agentes desnaturalizantes en diferentes niveles. Sin embargo, la mayoría de las proteínas se pueden desnaturalizar si sabes qué cambiar en el entorno de la proteína.
Pasos
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Usa el calor. El calor es una de las formas más fáciles y la forma más común de desnaturalizar una proteína. Cuando la proteína en cuestión está presente en los alimentos, el simple hecho de cocinar la comida desnaturalizará las proteínas. Muchas proteínas se pueden desnaturalizar al exponerlas a una temperatura de 100 °C (212 °F) o mayor. [2] X Fuente de investigación Esto les permite a las proteínas coagular y reducir su solubilidad.
- La duración de la exposición depende de qué expones al calor. Un huevo, por ejemplo, se puede cocinar en una sartén a fuego medio en 5 minutos, mientras que una carne asada puede tardar horas en cocinarse en un horno. [3] X Fuente de investigación
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Aplica alcohol. El alcohol interrumpe los enlaces de hidrógeno que ocurren entre los grupos amida. Cuando una proteína se expone a una solución de alcohol, las moléculas de alcohol forman nuevos enlaces con la cadena de proteína. Usa una solución de alcohol al 70 % para romper la pared celular de las bacterias y desnaturalizar la proteína. [4] X Fuente de investigación
- Los alcoholes concentrados pueden ser peligrosos, ya que son inflamables y tóxicos. Siempre usa equipos de seguridad completos, incluyendo guantes y protección para los ojos, y manipúlalos en un entorno seguro y con una temperatura controlada.
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Cambia el pH. La estructura interna de una proteína se puede descomponer cuando su entorno es muy ácido o muy alcalino, ya que interrumpen los enlaces iónicos que mantienen juntos los puentes de sal de la proteína. Añade una solución ácida o básica a la proteína. El entorno debe estar en un pH superior a 10 o inferior a 4 para promover la desnaturalización. [5] X Fuente de investigación Si vas a inducir el cambio con ácido, el pH debe estar entre 2 y 5. [6] X Fuente de investigación
- Cambiar el pH puede ionizar un aminoácido, dependiendo del pKa de cada grupo funcional en ese aminoácido. También puede ionizar el grupo amino o el grupo carboxilo presente en el aminoácido.
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Prueba con sales de metales pesados. Los metales pesados pueden alterar los enlaces en la proteína, haciendo que pierda su estructura. Las sales de los metales pesados como el mercurio y el plomo se pueden usar para desnaturalizar varias proteínas. Estas sales están disponibles en la mayoría de los proveedores de productos químicos, y siempre se deben usar con precaución y con los equipos de seguridad adecuados, incluyendo guantes y protección para los ojos. [7] X Fuente confiable PubMed Central Ir a la fuente
- Los metales pesados pueden interactuar con los grupos funcionales de la cadena lateral de una proteína para formar complejos. Los metales pesados también oxidan las cadenas laterales de aminoácidos de la proteína. [8] X Fuente confiable PubMed Central Ir a la fuente
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Determina si una proteína se puede volver a plegar. Algunas formas de desnaturalización son permanentes, mientras que otras se pueden deshacer. Cocinar un huevo o una carne, por ejemplo, no se puede deshacer, pero una proteína que ha estado expuesta un pH alto puede recuperar su forma cuando se coloca en un ambiente más neutral. [9] X Fuente de investigación
- Ya sea que la proteína se puede replegar o no, dependerá de su ADN. El ADN contendrá la información necesaria para que la proteína regrese a su estado nativo. [10] X Fuente de investigación
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Elimina el factor desnaturalizante. Regresa el entorno de la proteína a la estasis y elimina el elemento desnaturalizante. Elimina el ácido o la base, por ejemplo, o reintroduce la proteína a una temperatura más razonable. [11] X Fuente de investigación
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Usa un kit de renaturalización. Muchas compañías de suministros de laboratorio venden kits de naturalización que te permiten seleccionar los mejores parámetros para fomentar la renaturalización. Estos kits pueden ser especialmente útiles si trabajas con proteínas en un laboratorio o en un entorno experimental.Anuncio
Referencias
- ↑ https://www.education.com/science-fair/article/denaturing-proteins/
- ↑ http://bitesizebio.com/20794/the-nature-of-denaturing-protein-gels-that-is/
- ↑ http://chefsblade.monster.com/training/articles/216-food-science-basics-denaturing-proteins
- ↑ http://chemistry.elmhurst.edu/vchembook/568denaturation.html
- ↑ http://www.chemistryexplained.com/Co-Di/Denaturation.html
- ↑ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/9780470015902.a0003004.pub2
- ↑ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18501191
- ↑ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18501191
- ↑ http://www.biology-pages.info/D/DenaturingProtein.html
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