Pdf downloaden
Pdf downloaden
Een pipet is een bepaald type laboratoriumapparatuur die wordt gebruikt om zeer kleine hoeveelheden vloeistof te meten en over te brengen. Nauwkeurigheid en precisie in de pipetmeting zijn noodzakelijk omdat elke afwijking in de afgegeven volumes de resultaten van een experiment kan beïnvloeden. Om de nauwkeurigheid te garanderen, is het noodzakelijk om de pipetkalibratie om de paar maanden te controleren. Het kalibratieproces helpt om te controleren of de apparatuur de juiste volumes doseert, zodat dit kan worden hersteld als dat niet het geval is.
Stappen
-
Verzamel de benodigde materialen. Om de kalibratie van een pipet te controleren, heb je een pipet, pipetpunten, gedestilleerd water, een bekerglas, thermometer, een balans en schaaltjes nodig. De balans moet specifiek zijn voor microgrammen om micropipetten te kalibreren met een maximum van 1 µl. [1] X Bron
- Je hebt niet meer dan 5 ml water nodig. Vul de beker met het water.
- Zorg ervoor dat de pipetpunten goed passen.
-
Meet de temperatuur van het gedistilleerde water. Plaats de thermometer in het water en laat het minstens één minuut staan. Als de rode lijn op de thermometer nog steeds beweegt, laat hem dan nog een minuut staan. Noteer na een minuut de temperatuur in een notitieboekje. Verwijder de thermometer en droog hem af als je klaar bent. [2] X Bron
- De temperatuur van het water is belangrijk voor de berekeningen die gedaan worden om de kalibratie te controleren.
-
Plaats de schaal op de balans en zet hem op nul. Idealiter gebruik je een balans met deuren en een geïsoleerde kamer. Plaats de schaal in de kamer en sluit de deuren. Als er geen deuren zijn, plaats de schaal dan gewoon op de balans. Druk op de 'Nul' of 'Tarra'-knop en wacht tot de balans nul aangeeft. [3] X Bron
- Door het op nul zetten van de balans, wordt het gewicht van de plastic schaal niet meegenomen en wordt het mogelijk om alleen het gewicht te meten van wat je in de schaal stopt.
-
Bereid de pipet voor op kalibratie. Veeg de pipet af met ethanol om eventuele verontreinigingen te doden voordat je begint -- zorg er daarnaast voor dat het uiteinde van de pipet niet verstopt raakt. Plaats de juiste punt op het uiteinde en stel het volume in dat je wilt testen. [4] X Bron
- Voor kalibratie test je zowel het kleinste volume als het grootste volume dat de pipet kan afgeven. [5] X Bron
-
Spoel de tip voor het kalibreren door. Druk de knop tot de eerste stop in en steek de punt in het gedestilleerde water, zodat ongeveer 2 mm ervan in de vloeistof is ondergedompeld. Laat de knop los om wat vloeistof op te zuigen en geef de vloeistof vervolgens weer af door de knop naar beneden te drukken. Herhaal dit drie keer om de punt door te spoelen. [6] X Bron
- Druk de knop tot de tweede stop in om alle vloeistof die in de punt is achtergebleven te doseren, en verwijder de pipet uit het water.
-
Zuig het kalibratievolume op. Met de punt uit de vloeistof druk je de knop naar beneden tot de eerste stop. Plaats ongeveer 2 mm van de punt in het gedestilleerde water en laat de knop los om de vloeistof in de punt te zuigen. Wacht ongeveer een seconde voordat je de punt uit het water haalt. [7] X Bron
- Zorg ervoor dat het uiteinde volledig ondergedompeld is tijdens het hele aspiratieproces. Je wilt geen bubbels in de punt, anders zal het resultaat niet kloppen.
-
Doseer de vloeistof in de schaal op de balans. Plaats de punt tegen de bodem van de schaal en druk de knop naar beneden tot de eerste stop. Ga naar een andere plek, iets van het water af, en druk de knop naar de tweede stop. Houd de knop ingedrukt en til de punt van de schaal. [8] X Bron
- Houd de punt op de pipet, want je gaat hem weer gebruiken om meer ijktesten te doen. Zorg ervoor dat de punt niets aanraakt.
-
Noteer het gewicht dat de balans aangeeft. Sluit de deur als je een balans in een geïsoleerde kamer gebruikt. Wacht tot de waarden niet meer veranderen. Noteer deze waarde in je schrift. [9] X Bron
- Het is belangrijk om te wachten tot het nummer gestabiliseerd is vooraleer het te noteren. Je meetwaarden zullen verkeerd zijn als je niet wacht.
-
Herhaal dit proces tot je ten minste 10 metingen hebt genomen. Zet de balans op nul, spoel de punt door, zuig hetzelfde volume op, geef het volume af en neem dan het gewicht op. Je hebt meerdere opnames van hetzelfde volume nodig en dan kun je het gemiddelde nemen van alle opnames samen. [10] X Bron
- Je kunt ditzelfde proces herhalen met verschillende volumes, zolang je maar meerdere metingen per volume verricht.
Advertentie
-
Gebruik de formule voor het berekende volume. De formule voor het berekenen van het door de pipet afgegeven volume is V = w *Z, waarbij w het gewicht van het water is, Z de omrekeningsfactor op basis van de dichtheid van het water en V het berekende volume van hoeveel water er is afgegeven.
- Je kunt de Z-variabele vinden door de dichtheid van het water op te zoeken met behulp van de temperatuur die aan het begin van het experiment is geregistreerd. [11] X Bron
- Bijvoorbeeld: Als de temperatuur van het water 23°C was, dan ga je uit van een Z-waarde van 1,0035 µg/mg.
-
Bereken het gemiddelde van de herhaalde proeven. Je moet het volume van het water dat door de pipet wordt afgegeven minstens 10 keer hebben gewogen. Om het gemiddelde van al deze waarden te berekenen, tel je ze bij elkaar op en deel je ze door 10. Als je meer of minder proeven hebt gedaan, tel je elke proef erbij op en deel je de som door het totale aantal proeven.
- Bijvoorbeeld: De tien gewichten die je hebt geregistreerd voor een pipetvolume van 10µl zijn als volgt: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 en 9,98.
- Het gemiddelde is: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98)/10 = 99,84/10 = 9,984
-
Pas de variabelen toe op de vergelijking en los hem op. Als je eenmaal de juiste waarden voor elke variabele hebt bepaald, kun je ze in de vergelijking verwerken en oplossen voor het berekende volume. Om dit op te lossen, vermenigvuldig je simpelweg het gemiddelde gewicht van alle testwaarden met de Z-waarde.
- Bijvoorbeeld: V = w *Z = 9,984 *1,0035 = 10,019
-
Bereken de nauwkeurigheid van de pipet. Om de nauwkeurigheid te berekenen kun je de vergelijking A = 100 x V avg /V 0 gebruiken, waarbij A de nauwkeurigheid van de pipet is, V avg het gemiddelde berekende volume, en V 0 de waarde die je voor de pipet hebt ingesteld. De nauwkeurigheid moet tussen 99-101% liggen. [12] X Bron
- Als de pipet goed gekalibreerd is, moet de berekende waarde zeer dicht bij de werkelijke waarde liggen die je op de pipet hebt ingesteld.
- Bijvoorbeeld: A = 100 x V avg /V 0 = 100 x 10,019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Deze pipet is goed gekalibreerd.
-
Stuur de pipet op voor kalibratie, indien nodig. Als je pipet de kalibratietest niet doorstaat, stop dan onmiddellijk met het gebruik ervan voor experimenten. Pipetten zijn zeer delicate en dure onderdelen van laboratoriumapparatuur. Je kunt de kalibratie niet zelf repareren, dus zal je ze moeten opsturen voor een goed onderhoud. Als alternatief zullen sommige bedrijven naar je lab komen en daar je pipetten kalibreren. [13] X Bron
- Neem voor het onderhoud contact op met het bedrijf dat je specifieke merk pipet maakt.
Advertentie
Bronnen
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://www.pipettecalibration.net/pipette-calibration-files/guide-to-pipetting-2.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
- ↑ http://g6pd.qap.tw/Pipette%20calibration.pdf
Over dit artikel
Deze pagina is 4.872 keer bekeken.
Advertentie
Meld je aan voor de gratis nieuwsbrief van wikiHow!
Je vindt dan elke week handige handleidingen in je inbox.
Meld me aan!
