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Em química, a diluição é um processo que reduz a concentração de uma substância em uma solução. Quando feita em série, ela é uma diluição repetida de uma solução que amplia rapidamente o fator de diluição. [1] X Fonte de pesquisa Geralmente, ela é realizada em experiências que requerem soluções altamente diluídas com grande precisão, como aquelas que envolvem as curvas de concentração em uma escala logarítmica ou para determinar a densidade de bactérias. Além disso, ela é amplamente utilizada em ciências experimentais como bioquímica, microbiologia, farmacologia e física.
Passos
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Determine o líquido ideal para a diluição. O líquido no qual a substância será diluída é muito importante. Muitas soluções serão diluídas em água destilada, mas o caso nem sempre será esse. Se a diluição for de bactérias ou de outras células, provavelmente elas serão diluídas em um meio de cultura. [2] X Fonte de pesquisa O líquido escolhido será utilizado para cada diluição em série.
- Se você não tiver certeza sobre qual líquido usar, peça ajuda ou pesquise online para conferir se outras pessoas já realizaram uma diluição similar.
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Prepare vários tubos de ensaio com 9 ml do líquido de diluição. Esses tubos serão as amostras puras para diluição. [3] X Fonte de pesquisa A amostra não diluída será adicionada ao primeiro tubo e, em seguida, ela será diluída em série nos tubos seguintes.
- Uma técnica útil é etiquetar todos os tubos antes de começar para não haver confusão depois que começar as diluições.
- Cada tubo conterá uma diluição de dez vezes do tubo não diluído. [4] X Fonte de pesquisa O primeiro tubo será uma diluição de “1:10”, o segundo de “1:100”, o terceiro uma mistura “1:1000”, e assim por diante. No entanto, determine com antecedência o número de diluições necessárias para não desperdiçar tubos ou líquido de diluição.
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Prepare um tubo de ensaio com, pelo menos, 2 ml de solução não diluída. A quantidade mínima necessária para realizar essa diluição em série é de 1 ml de solução não diluída. No entanto, se houver apenas 1 ml não restará nada da solução. Rotule esse tubo com “SND” para “solução não diluída”.
- Misture bem a solução antes de começar qualquer diluição. [5] X Fonte de pesquisa
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Faça a primeira diluição. Use uma pipeta para transferir 1 ml de solução não diluída do tubo de ensaio “SND” para o tubo de ensaio rotulado com “1:10”, contendo 9 ml do líquido de diluição, e misture bem. Agora, há 1 ml da solução não diluída em 9 ml do líquido de diluição. Portanto, a solução foi diluída por um fator de dez.
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Faça a segunda diluição. Nessa parte da diluição em série, passe 1 ml da solução do tubo “1:10” para o tubo “1:100”, que tem 9 ml do líquido de diluição. No entanto, misture bem o tubo “1:10” antes de passar o líquido para o tubo seguinte. Em seguida, após a diluição, misture também o tubo “1:100”. Dessa forma, a solução no tubo de ensaio “1:10” foi diluída dez vezes no tubo “1:100”.
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Estenda o procedimento para realizar diluições em série maiores. Esse processo pode ser repetido tantas vezes quantas forem necessárias até atingir a solução desejada. Em uma experiência envolvendo curvas de concentração é possível utilizar uma diluição em série para criar uma série de soluções com diluições de 1, “1:10”, “1:100” e “1:1000”.Publicidade
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Calcule a proporção da diluição final da diluição em série. A proporção total da diluição pode ser determinada multiplicando-se o fator de diluição de cada etapa até a etapa final. Isso pode ser matematicamente ilustrado pela equação D t = D 1 x D 2 x D 3 x … x D n onde D t é o fator de diluição total e D n é a proporção da diluição. [6] X Fonte de pesquisa
- Por exemplo, digamos que você fez uma diluição de “1:10” do líquido quatro vezes. Conecte o fator de diluição à equação: D t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
- O fator de diluição final do quarto tubo na diluição em série é “1:10000”. A concentração da substância agora é dez mil vezes menor que a solução não diluída original.
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Determine a concentração da solução após a diluição. Para determinar a concentração final da solução após a diluição em série será necessário saber a concentração inicial. A equação é a seguinte: C final = C inicial / D onde C final é a concentração final da solução diluída, C inicial é a concentração inicial da solução original e D é a proporção previamente determinada da diluição. [7] X Fonte de pesquisa
- Por exemplo: se uma solução inicial de células tem uma concentração de 1.000.000 células por ml e a proporção de diluição é de 1000, qual é a concentração final da amostra diluída?
- Use a equação:
- C final = C inicial / D
- C final = 1.000.000 / 1000
- C final = 1000 células por ml
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Verifique se todas as unidades coincidem. Ao realizar qualquer cálculo é necessário que as unidades sempre coincidam no final. [8] X Fonte de pesquisa Se começar com células por ml, procure terminar com células por ml. Se a concentração inicial for partes por milhão (ppm), então a concentração final também deverá ser ppm.Publicidade
Referências
- ↑ http://abacus.bates.edu/~ganderso/biology/resources/dilutions.html
- ↑ http://study.com/academy/lesson/serial-dilution-in-microbiology-calculation-method-technique.html
- ↑ http://study.com/academy/lesson/serial-dilution-in-microbiology-calculation-method-technique.html
- ↑ http://biology.kenyon.edu/courses/biol09/tetrahymena/serialdilution2.htm
- ↑ http://scienceprimer.com/serial-dilution
- ↑ http://abacus.bates.edu/~ganderso/biology/resources/dilutions.html
- ↑ http://www.ausetute.com.au/dfactor.html
- ↑ http://www.ausetute.com.au/dfactor.html
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